二手賽默飛熒光定量PCR儀（QuantStudio系列）應(yīng)用與技術(shù)綜述

一、熒光定量PCR技術(shù)背景

熒光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR，簡(jiǎn)稱qPCR）是一種利用熒光染料或探針技術(shù)實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增過(guò)程實(shí)時(shí)監(jiān)控與定量分析的分子生物學(xué)工具。通過(guò)對(duì)熒光信號(hào)變化進(jìn)行采集與解析，qPCR能在每個(gè)循環(huán)階段對(duì)靶標(biāo)DNA或RNA的數(shù)量進(jìn)行定量判斷，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品安全、生物制藥及疾病監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。

賽默飛（Thermo Fisher Scientific）旗下的Applied Biosystems品牌開(kāi)發(fā)了一系列熒光定量PCR系統(tǒng)（如QuantStudio 3、5、7、12K Flex等），在實(shí)驗(yàn)通量、檢測(cè)靈敏度和系統(tǒng)操作性上不斷優(yōu)化，適應(yīng)不同層次科研與檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的核酸檢測(cè)需求。

二、QuantStudio系列主要型號(hào)介紹

1. QuantStudio 3

• 檢測(cè)通道：4通道光學(xué)系統(tǒng)（適配SYBR、FAM、VIC、ROX）

• 通量：96孔標(biāo)準(zhǔn)板

• 適用對(duì)象：日常教學(xué)實(shí)驗(yàn)、低通量實(shí)驗(yàn)室、初創(chuàng)平臺(tái)

• 操作方式：支持本機(jī)觸控屏控制或計(jì)算機(jī)軟件控制

• 備注：適合日?；虮磉_(dá)分析、樣品篩查等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)任務(wù)

2. QuantStudio 5

• 檢測(cè)通道：4通道或6通道可選

• 通量：96孔板，部分版本支持384孔

• 適用場(chǎng)景：通量適中科研組、臨床前研究平臺(tái)

• 功能特點(diǎn)：集成Wi-Fi遠(yuǎn)程管理功能，具備軟件權(quán)限分級(jí)管理

• 軟件配套：Design & Analysis v2.6及云端平臺(tái)

3. QuantStudio 7 Flex

• 通量：支持96孔、384孔和TaqMan Array卡（靈活更換樣本塊）

• 檢測(cè)能力：可擴(kuò)展至高通量快速模式

• 適用場(chǎng)景：大型實(shí)驗(yàn)室、檢測(cè)機(jī)構(gòu)、高密度樣本篩查

• 特點(diǎn)：光路系統(tǒng)優(yōu)化，提升邊緣孔檢測(cè)穩(wěn)定性

4. QuantStudio 12K Flex

• 通量：最高支持12,000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)/運(yùn)行（使用OpenArray技術(shù)）

• 用途：大規(guī)模遺傳篩查、藥物反應(yīng)性分析、群體基因表達(dá)測(cè)定

• 備注：集成多種擴(kuò)展模塊，適合進(jìn)行個(gè)體化醫(yī)學(xué)研究

三、關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)總覽

四、典型應(yīng)用場(chǎng)景

1. 基因表達(dá)分析：對(duì)多個(gè)樣本中的mRNA水平進(jìn)行比較，評(píng)估基因調(diào)控狀況。

2. 病原檢測(cè)：病毒、細(xì)菌、支原體等微生物核酸定量分析，如、流感等病毒篩查。

3. 拷貝數(shù)變異分析（CNV）：用于基因組結(jié)構(gòu)變異檢測(cè)，適用于腫瘤、遺傳性疾病分析。

4. 突變檢測(cè)與SNP分型：配合TaqMan探針，進(jìn)行點(diǎn)突變、高通量遺傳篩查。

5. 微RNA分析：在較小RNA片段中進(jìn)行差異表達(dá)研究。

6. 食品安全與轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)：檢測(cè)GMO成分、致病菌殘留等。

7. 藥物研發(fā)與反應(yīng)預(yù)測(cè)：評(píng)價(jià)藥物在不同人群中的代謝基因表達(dá)情況。

五、二手設(shè)備配置與檢測(cè)流程

我們常見(jiàn)的二手QuantStudio儀器通常包括以下組件：

• 主機(jī) × 1（已檢測(cè)光路、電控、散熱系統(tǒng)）

• 原裝或兼容電源線 × 1

• 軟件操作指南 × 1（電子或紙質(zhì)）

• 預(yù)裝操作系統(tǒng) + USB接口 × 若干

• 模塊加熱塊（按型號(hào)選配）

• 出廠檢測(cè)報(bào)告、驗(yàn)證記錄（如提供）

檢測(cè)流程標(biāo)準(zhǔn)包括：

• 熱模塊均勻性校驗(yàn)（溫差≤ ±0.25°C）

• 熒光通道對(duì)比實(shí)驗(yàn)（使用標(biāo)準(zhǔn)染料）

• 循環(huán)控制系統(tǒng)連續(xù)運(yùn)行穩(wěn)定性測(cè)試

• 通信端口（USB、LAN）響應(yīng)測(cè)試

• 軟件兼容性驗(yàn)證（Windows環(huán)境下運(yùn)行）

六、設(shè)備選型建議

七、使用與維護(hù)建議

1. 實(shí)驗(yàn)前校準(zhǔn)通道靈敏度：可通過(guò)染料參考板比對(duì)信號(hào)線性，防止通道偏差。

2. 預(yù)熱與降溫過(guò)程遵循規(guī)范：盡量避免頻繁開(kāi)關(guān)機(jī)以保護(hù)Peltier組件。

3. 定期軟件升級(jí)：確保與最新的染料數(shù)據(jù)庫(kù)兼容，并修復(fù)潛在漏洞。

4. 數(shù)據(jù)定期備份：運(yùn)行結(jié)束后建議立即備份數(shù)據(jù)，避免誤刪或系統(tǒng)異常。

5. 使用專用板與封板膜：避免使用不匹配耗材引起孔間污染或信號(hào)漂移。

6. 清潔維護(hù)注意防塵：定期清理散熱風(fēng)口、鏡頭及濾光片區(qū)域。

八、關(guān)于采購(gòu)二手PCR設(shè)備的建議

• 關(guān)注設(shè)備年份與運(yùn)行時(shí)間：合理評(píng)估系統(tǒng)使用壽命與維護(hù)頻率。

• 優(yōu)先選擇保養(yǎng)記錄完整的設(shè)備：設(shè)備使用歷史清晰，有助于后續(xù)追蹤問(wèn)題。

• 要求出廠檢測(cè)報(bào)告：確保熱循環(huán)系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、控制系統(tǒng)運(yùn)作正常。

• 核實(shí)軟件兼容性：確認(rèn)是否支持當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室操作系統(tǒng)（如Windows 10）。

• 售后服務(wù)與配件匹配：如無(wú)維護(hù)渠道，建議選擇有本地技術(shù)支持的商家。

九、總結(jié)

賽默飛熒光定量PCR儀（QuantStudio系列）涵蓋從基礎(chǔ)科研到高通量篩查的多種實(shí)驗(yàn)需求。二手設(shè)備在功能完整、性能達(dá)標(biāo)的前提下，為實(shí)驗(yàn)室提供了較靈活的預(yù)算控制方案。通過(guò)規(guī)范的檢測(cè)流程、明確的應(yīng)用匹配、合理的使用方式，可以實(shí)現(xiàn)科學(xué)、高效的核酸定量分析工作。